Em 1985, surgiu a primeira geração de ensaios para o diagnóstico da infecção pelo HIV. Esses ensaios empregavam antígenos virais, obtidos a partir da lise viral em cultura de células. A detecção de anticorpos, baseada na metodologia denominada ELISA indireto, está detalhada na imagem.

Disponível em: https://cutt.ly/9wo13d5D. Acesso em: 17 jul. 2023 (adaptado).
Em qual etapa mostrada na imagem é adicionada a amostra sanguínea do indivíduo a ser diagnosticado?
I
II
III
IV
V
Gabarito:
II
A) Incorreto. Na etapa I, estão presentes os antígenos do HIV. Esse material faz parte do teste de detecção, sendo obtido previamente a partir da lise viral em cultura de células, portanto, não é adicionada a amostra sanguínea do paciente nessa etapa.
B) Correto. O IgG anti-HIV é o anticorpo produzido pelas pessoas contaminadas pelo vírus HIV e presente nas amostras de sangue submetidas ao teste ELISA. Na imagem, esse anticorpo, com a amostra sanguínea, é adicionado na etapa II.
C) Incorreto. Na etapa III, são adicionados anticorpos anti-IgG humana, para a detecção da presença de anticorpos no sangue do paciente, além da enzima que reagirá com o substrato. Esse material faz parte do kit para testagem, não estando presente no sangue do paciente.
D) Incorreto. Na etapa IV, é adicionado ao teste um substrato que reagirá com as enzimas adicionadas na etapa anterior, caso o paciente possua anticorpos contra o HIV. Esse substrato é composto de um cromógeno, material que possui cor, mais peróxido de hidrogênio, portanto, não está presente na amostra sanguínea do paciente.
E) Incorreto. Na etapa V, não há a adição de nenhum material ao teste, ocorre apenas a reação de degradação do substrato a partir das enzimas, material adicionado nas etapas anteriores.